Was ist Fluoreszenz Fluorochrome Fluoreszenzmikroskop CLSM

Strahltrennung

 

Um das Fluoreszenzlicht optimal zu selektieren ist es wichtig, dass die verwendeten Filter auf die spezifischen Anregungs- und Emissionsspektren des fluoreszierenden Moleküls angepasst sind.

  • In den meisten Fällen erfolgt die Filterung durch gefärbtes Glas. Dieses ist spezifisch durchlässig für bestimmte Wellenlängen. Grundsätzlich können dabei Kantenfilter und Bandfilter unterschieden werden.
  • Eine Trennung von Wellenlängenbereichen ist auch mit dichroitischen Spiegeln möglich. Diese speziell bedampften Spiegel reflektieren bestimmte Wellenlängen und lassen andere durch.
  • Filter und dichroitische Spiegel sind zwar exakt an Farbstoffe angepasst, aber sehr unflexibel. Eine variable Filterung des Lichtes ist mit Prismen oder Beugungsgittern möglich.

Bessere Mikroskope können mehrere Methoden zur Strahltrennung gleichzeitig und auf mehreren Kanälen anwenden.