Durchlicht-Dunkelfeld - Fluoreszenz

Durch die Verwendung eines Dunkelfeldkondensors ist die Intensität des Anregungslichtes zwar etwas geringer, dafür gelangt aber nur ein extrem kleiner Teil des Angregungslichtes direkt ins Objektiv.

Vom Sperrfilter kann dieses geringe Anregungslicht leicht absorbiert werden; man erhält einen schönen dunklen Untergrund und damit einen weit besseren Kontrast als in der Hellfeld-Durchlicht-Fluoreszenz.

Bei Durchlichtfluoreszenz-Verfahren ist für numerische Aperturen unter 0,6 das Dunkelfeld die bessere Methode.

Aufgrund des guten Kontrastes, den man durch den dunklen Untergrund erhält, können auch bei stärkeren Vergrößerungen noch gute Ergebnisse erzielt werden.

Da die Intensität des Anregungslichts durch den Dunkelfeldkondensor abgeschwächt wird, ist das Präparat keinen so starken Lichtintensitäten ausgesetzt und viele Fluoreszenzfarbstoffe bleichen auch nicht so schnell aus; daher können allerdings auch nicht ganz so starke Fluoreszenzintensitäten erreicht werden.

Durchlicht-Dunkeld-Fluoreszenz lässt sich mit den passenden Filtern und einem Dunkelfeldkondensor ebenfalls leicht provisorisch herstellen. Der Anregungsfilter wird dazu auf die Lichtaustrittsöffnung und der Sperrfilter auf das Okular gelegt.