Was ist Fluoreszenz Fluorochrome Fluoreszenzmikroskop CLSM

Reduktion von „Out of Focus“ – Licht

 

Blenden

Die einfachste Möglichkeit Streulicht, also Fluoreszenzlicht, das nicht aus der Focusebene des Bildfeldes stammt, zu reduzieren ist die Verwendung von Blenden.

 

 

 

Feldblende

Mit der Feldblende kann der ausgeleuchtete Bereich auf das Bildfeld oder sogar nur auf einen kleineren Bereich, der von Interesse ist, eingeschränkt werden.
Damit wird nur ein sehr kleiner Bereich angeregt und Streulicht aus Bereichen außerhalb des Bildfeldes kann verhindert werden.

Feldblende offen

Feldblende offen

 

 

Feldblende geschlossen

Feldblende geschlossen

 

Aperturblende

Durch Schließen der Aperturblende kann Streulicht aus dem Bildfeldbereich reduziert werden, wobei auch die Intensität des Fluoreszenzbildes abnimmt.

 

Bei neueren Fluoreszenzmikroskopen befindet sich eine eigene Aperturblende für die Auflichtbeleuchtung im Strahlengang; somit können auch Objektive ohne Aperturblende für die Fluoreszenzmikroskopie verwendet werden!!

 

Bei älteren Mikroskopen ist in den meisten Fällen keine eigene Aperturblende vorhanden und man ist, vor allem bei stärkeren Vergrößerungen, auf die Verwendung von Objektiven mit Irisblende angewiesen.

Aperturblende offen

Fluoreszenz überstrahlt

Aperturblende geschlossen

keine Überstrahlung